GF-1 LR3, zkratka pro Long R3 Insulin-jako Growth Factor-1, běžně známý jako LR3 nebo Long R3, je upravená verze endogenního IGF-1. Lidský IGF-1 má původně 70 peptidů (7,6 kDa). Má 13 aminokyselin (MFPAMPLSSLFVN…) pevně připojených na N-konci a třetí glutamát (Glu) byl nahrazen Arg, což vede k 83-peptidu, 9117,5 Da, CAS 946870-92-4.
Nativní IGF-1 je okamžitě vázáno šesti IGFBP (vazebnými proteiny), z nichž méně než 1 % je ve volném stavu a poločas v plazmě je- pouhých 15 minut, takže je extrémně obtížné provádět dlouhodobě-působící signalizační testy. Tato modifikace LR3 drasticky snížila jeho afinitu k IGFBP přibližně 1000krát, maximalizovala podíl volných peptidů a prodloužila poločas na 20–30 hodin, při zachování stejné afinity k receptoru (IGF-1R) jako u originálu, což z něj v podstatě dělá „nevázaný IGF-1“.
Vazba IGF-1R (tyrosinkináza) → spouští dvě cesty: PI3K/Akt/mTOR a MAPK/ERK. To vede k ribozomální fosforylaci S6K a 4E-BP1, úplné translaci proteinu a supresi FoxO, což vede k rozpadu a syntéze proteinu. To podporuje proliferaci a diferenciaci myoblastů/C2C12, chondrocytů, CHO buněk a MSC.
Základní výzkumná hodnota (nerozumějte chybně jako „růst svalů s jedinou injekcí“):
Dlouho{0}}působící IGF-1R sonda: Stabilní obsazení receptorů v séru/systémech obsahujících IGFBP, výrazně čistší než původní IGF-1, pokud jde o trvání signálu, downregulaci receptoru a kinetiku mTOR.
Sérový-bez/nízký{1}}zlatý partner sérové kultury: Repligen's LONG R3 IGF-I je doplněk průmyslové{4}}třídy, který inhibuje apoptózu a zvyšuje hustotu CHO/MSC, nabízí větší stabilitu a nižší cenu než inzulín.
Approximately 3 times the in vitro potency of the original IGF-1, requiring less dosage; however, high concentrations (>200 ng/ml) může ve skutečnosti downregulovat receptorovou endocytózu a podporovat proliferaci krevních destiček; vyšší koncentrace nejsou vždy lepší.
Upozornění: Toto není klinický lék; nebyla schválena FDA a WADA ji řadí do šedé zóny pro peptidy. Režim „50-100 ug subkutánní ablace“ používaný ve fitness komunitě je komunitní dávka, nikoli výzkumný protokol. Navíc samotný IGF-1R je spojen s proliferací nádoru a dlouhodobé nesprávné užívání s sebou nese významná teoretická rizika.
Skladování (lyofilizovaný prášek činidla, 9 kDa protein není malý peptid)
Nerekonstituovaný lyofilizovaný prášek: Uchovávejte při -20 stupních, uzavřený, chráněný před světlem a s vysoušedlem po dobu 1–3 let. Nejstabilnější je archivace při -80 stupních. Neskladujte dlouhodobě při 4 stupních a neskladujte při pokojové teplotě.
Rekonstituovaný zásobní roztok: Většina značek doporučuje počáteční rekonstituci sterilní 0,1% kyselinou octovou (pH 3,5–4,5) (přímé rozpuštění v neutrální vodě způsobí agregaci!), koncentrace 0,1–2 mg/ml; skladovatelnost je pouze 2–7 dní při 2–8 stupních. Pro dlouhodobé-skladování musí být alikvotně rozděleno se zaváděcím médiem (0,1 % BSA / 5 % HSA / 5 % trehalóza / 10 % FBS). Jedna porce při -80 stupních může vydržet 3–12 měsíců.
Pracovní roztok: Zřeďte PBS nebo kompletním kultivačním médiem obsahujícím 0,1 % BSA. Krátce skladujte v místnosti pro buněčnou kulturu při 4 stupních. Vyhněte se opakovaným cyklům zmrazování-rozmrazování.
Opatření:
Před otevřením centrujte při 8000–12000 g po dobu 30 sekund. Pro lyofilizaci proteinu 9 kDa přilepte lahvičku ke stěně a uzávěru. Nepřidávejte vodu přímo bez odstřeďování; "neviditelný prášek" na dně lahvičky jsou peníze.
Pro počáteční rozpuštění použijte 0,1% kyselinu octovou k pomalému víření podél buněčné stěny, vyhněte se vortexování. Každý vír naruší konformaci o polovinu. Pomalu promíchejte otáčením/obrácením zkumavky, dokud nebude čirá a bezbarvá. Zlikvidujte jakýkoli roztok, který je mlhavý nebo vločkovitý, protože agregované receptory LR3 budou mít nulovou vazebnou afinitu.
Nízké koncentrace způsobují nadměrnou adsorpci na stěnu zkumavky: Když je pracovní koncentrace 1–100 ng/ml, nepoužívejte 0,1% BSA jako nosič nebo zkumavky s nízkou adsorpcí. Skutečné množství přidané do jamek bude činit pouze 30–50 % nominální koncentrace, což bude mít za následek alarmující intracelulární objemové emise (CV).
Citlivost na pH: Zásobní roztok kyseliny octové nepřidávejte přímo k buňkám (pH šok buňky zabíjí). Před přidáním do kultivačního systému před-řeďte alespoň 1:100 na neutrální pufr obsahující BSA.
Monitorování CoA: HPLC větší nebo rovno 98 %, potvrzení MS 9117,5 Da, endotoxin<0.01–1 EU/μg (stricter requirements for cell therapy-grade MSCs); oxidized Met or its truncated form are latent antagonists. RUO label: The label reads "Research Use Only, not for human use," indicating it's not a legally approved drug for human injection; it's for internal use within the IACUC system. Don't mistake peptide suppliers for pharmacies.
Pro proliferační experimenty jsou nezbytné tři kontroly: slepá kontrola homologního séra + původní ekvimolární kontrola IGF-1 + inhibitor IGF-1R (pikropodofylin/OSI-906). V opačném případě není jasné, zda je LR3 aktivní složkou, nebo k tomu přispívají jiné faktory v séru.
Populární Tagy: Specialized Bodybuilding Peptide Drugs IGF1-LR3 0.1mg/lahvička 1mg/lahvička, Čína Specialized Bodybuilding Peptide Drugs IGF1-LR3 0.1mg/lahvička 1mg/lahvička výrobci, dodavatelé, továrna
